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人Flag標(biāo)簽ELISA試劑盒,(Flag-tag)酶免檢測(cè)

更新時(shí)間:2019-03-29      瀏覽次數(shù):2243

人Flag標(biāo)簽ELISA試劑盒,(Flag-tag)酶免檢測(cè)

人Flag標(biāo)簽(Flag-tag)ELISA試劑盒僅供科研使用

 

實(shí)驗(yàn)原理:                                     

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包人Flag標(biāo)簽Flag-tag)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人Flag標(biāo)簽Flag-tag)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。


試劑盒組成:

 

 

 

 

試劑盒操作步驟:

 

 

 

 

實(shí)驗(yàn)所需自備試驗(yàn)器材:

1. 酶標(biāo)儀(450nm)

2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒溫箱

4. 蒸餾水或去離子水

 

實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算:

 

繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在Excel工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)OD值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。

 

 

 

試劑盒性能:

1. 檢測(cè)范圍:0.625 ng/ml - 20 ng/ml

2. 靈敏度:低檢測(cè)濃度小于0.1 ng/ml

3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

4. 重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ,板間變異系數(shù)小于15% 。

 

技術(shù)小提示:

1. 當(dāng)混合或重溶蛋白溶液時(shí),盡量避免起沫。

2. 為了避免交叉感染,配置不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品、上樣、加不同試劑都需要更換槍頭。另外不同試劑請(qǐng)分別使用不同的移液槽。

3. 每次孵育時(shí),請(qǐng)正確使用封板膠可保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。

4. 混合后的顯色底物在上板前應(yīng)為無色,請(qǐng)避光保存;假如微孔板后,將由物色變成不同深度的藍(lán)色。

 

5. 終止液上板順序應(yīng)同顯色底物上板順序一致;加入終止液后,孔內(nèi)顏色由藍(lán)變黃;若孔內(nèi)有綠色,則表明孔內(nèi)液體未混勻;請(qǐng)充分混合。

 

產(chǎn)品有效期:6個(gè)月

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